Testul Kastle-Meyer este o metodă medico-legală ieftină, ușoară și de încredere pentru a detecta prezența sângelui. Iată cum se efectuează testul.
materiale
Soluția Kastle-Meyer
70% procent etanol
apă distilată sau deionizată
3% procent de peroxid de hidrogen
betisoare de vata
picurator sau pipetă
o mostră de sânge uscat
Efectuați etapele de testare a sângelui Kastle-Meyer
Umectați un tampon cu apă și atingeți-l la o probă de sânge uscată. Nu trebuie să frecați tare sau să înveliți tamponul cu proba. Ai nevoie doar de o sumă mică.
Adăugați o picătură sau două de 70% procent etanol în tampon. Nu trebuie să înmuiați tamponul. Alcoolul nu participă la reacție, dar servește la expunerea hemoglobinei în sânge, astfel încât să poată reacționa mai pe deplin pentru a crește sensibilitatea testului.
Adăugați o picătură sau două din soluția Kastle-Meyer. Aceasta este o soluție de fenolftaleină, care ar trebui să fie incoloră sau galben deschis. Dacă soluția este roz sau dacă devine roz atunci când este adăugată la tampon, atunci soluția este veche sau oxidată, iar testul nu va funcționa. Tamponul trebuie să fie necolorat sau palid în acest moment. Dacă și-a schimbat culoarea, începeți din nou cu câteva soluții proaspete Kastle-Meyer.
Adăugați o picătură sau două soluții de peroxid de hidrogen. Dacă tamponul devine roz imediat, acesta este un test pozitiv pentru sânge. Dacă culoarea nu se schimbă, proba nu conține o cantitate detectabilă de sânge. Rețineți că tamponul își va schimba culoarea, devenind roz după aproximativ 30 de secunde, chiar dacă nu este prezent sânge. Acesta este rezultatul peroxidului de hidrogen care oxidează fenolftaleina în soluția indicatoare.
Metodă alternativă
În loc să udezi tamponul cu apă, testul poate fi efectuat prin umezirea tampoanei cu soluție de alcool. Restul procedurii rămâne același. Acesta este un test nedistructiv, care lasă eșantionul într-o stare astfel încât să poată fi analizat folosind alte metode. În practica reală, este mai frecvent să colectați un eșantion proaspăt pentru teste suplimentare.
Sensibilitatea și limitările testului
Testul de sânge Kastle-Meyer este un test extrem de sensibil, capabil să detecteze diluții ale sângelui până la 1:107. Dacă rezultatul testului este negativ, este o dovadă rezonabilă că heme (un ingredient din tot sângele) lipsește în probă. Cu toate acestea, testul va da un rezultat fals pozitiv în prezența unui agent oxidant în probă. Exemple includ peroxidasele găsite în mod natural în conopidă sau broccoli. De asemenea, este important de menționat că testul nu diferențiază între molecule de heme din diferite specii. Un test separat este necesar pentru a determina dacă sângele este de origine umană sau animală.
Cum funcționează testul
Soluția Kastle-Meyer este o soluție de indicare a fenolftaleinei care a fost redusă, de regulă reacționând cu zinc pudră. Baza testului este că activitatea de tip peroxidază a hemoglobinei în sânge catalizează oxidarea fenolftaleinei incolor redusă în fenolftaleină roz strălucitor.