Cum se face soluția tampon Tris pentru utilizare medicală sau de laborator

Soluțiile tampon sunt lichide pe bază de apă care includ atât un acid slab, cât și baza sa conjugată. Datorită chimiei lor, soluțiile tampon pot păstra pH-ul (aciditatea) la un nivel aproape constant, chiar și atunci când au loc schimbări chimice. Sistemele tampon apar în natură, dar sunt extrem de utile și în chimie.

Utilizări pentru soluții tampon

În sistemele organice, soluțiile tampon naturale păstrează pH-ul la un nivel consecvent, ceea ce face posibilă apariția reacțiilor biochimice fără a dăuna organismului. Atunci când biologii studiază procesele biologice, ei trebuie să mențină același pH constant; pentru a folosi acest lucru, au folosit soluții tampon pregătite. Soluțiile tampon au fost descrise pentru prima dată în 1966; multe dintre aceleași tampoane sunt folosite astăzi.  

Pentru a fi utile, tampoanele biologice trebuie să îndeplinească mai multe criterii. Mai exact, acestea trebuie să fie solubile în apă, dar nu solubile în solvenți organici. Acestea nu ar trebui să poată trece prin membranele celulare. În plus, trebuie să fie non-toxice, inerte și stabile pe parcursul oricărui experiment pentru care sunt utilizate.

Soluțiile tampon apar în mod natural în plasma sanguină, motiv pentru care sângele menține un pH constant între 7.35 și 7.45. Soluțiile tampon sunt de asemenea utilizate în:

• procesele de fermentare
• țesături pe moarte
• analiza chimica
• calibrarea pH-metri
• Extracția ADN-ului

Ce este soluția Tris Buffer?

Tris este scurt pentru tris (hidroximetil) aminometan, un compus chimic care este adesea utilizat în soluție salină, deoarece este izotonic și non-toxic. Deoarece are un Tris are un pKa de 8,1 și un nivel de pH între 7 și 9, soluțiile tampon Tris sunt de asemenea utilizate frecvent într-o serie de analize și proceduri chimice, inclusiv extracția ADN-ului. Este important să știți că pH-ul în soluția tampon tris se modifică cu temperatura soluției.

Emeldir / Wikimedia Commons / CC0 1.0

Cum să pregătiți Tris Buffer

Este ușor să găsiți o soluție tampon tris disponibilă comercial, dar este posibil să vă faceți singur cu echipamentul adecvat.

materiale:

Calculați cantitatea fiecărui element de care aveți nevoie, pe baza concentrației molare a soluției dorite și a cantității de tampon de care aveți nevoie.

• tris (hidroximetil) aminometan 
• apă distilată deionizată
• acid clorhidric

Procedură:

1. Începeți prin a determina ce concentrație (molaritate) și volumul de tampon Tris doriți să faceți. De exemplu, soluția tampon Tris folosită pentru soluție salină variază de la 10 la 100 mM. După ce ați decis ce faceți, calculați numărul de moli de Tris care sunt necesari înmulțind concentrația molară de tampon cu volumul tamponului care se face. (alunițe de Tris = mol / L x L)
2. Apoi, determinați câte grame de Tris este aceasta prin înmulțirea numărului de aluniți cu greutatea moleculară a Trisului (121,14 g / mol).  grame de Tris = (moli) x (121,14 g / mol)
3. Se dizolvă Tris-ul în apa deionizată distilată, 1/3 până la 1/2 din volumul final dorit.
4. Se amestecă în HCl (de exemplu, HCl 1M) până când pH-ul vă oferă pH-ul dorit pentru soluția de tampon Tris.
5. Diluează tamponul cu apă pentru a atinge volumul final dorit de soluție.

Odată ce soluția a fost pregătită, poate fi păstrată luni întregi într-un loc steril, la temperatura camerei. Perioada de valabilitate a soluției tampon Tris este posibilă, deoarece soluția nu conține proteine.